热稳定和可回收 Candida antarctica B脂酶在Bacillus subtilis上固定使用排序技术

科学领域:

• 生物催化和酶工程 生物催化和酶工程
• 微生物生物技术 微生物生物技术
• 蛋白质固定运动

背景情况:

• 酶固定对于工业应用至关重要,但传统方法在稳定性,可重复使用性和成本方面面临挑战.
• 开发强大的全细胞生物催化剂对于可持续的生物处理和减少环境影响至关重要.

研究的目的:

• 通过将 *Candida antarctica* 脂酶B (CALB) 固定在 *Bacillus subtilis* 细胞上来设计一种全细胞生物催化剂.
• 建立一种类酶介导的系统,用于稳定和特定地点的CALB的表面定.
• 评估用于工业应用的表面显示 CALB 的性能,稳定性和可重复使用性.

主要方法:

• 基因工程 CALB 变体具有 C-终端细胞壁结合图案.
• 在 * Bacillus subtilis * WASD (ΔwprA ΔsigD) 细胞中同时表达CALB变异和排序酶.
• 固定CALB活动,稳定性,可重复使用性和存储性能的表征.
• 表面显示的CALB在鱼油水解中的应用,以释放omega-3脂肪酸.

主要成果:

• 在*B. subtilis*表面上实现了CALB的稳定和特定位置的定,而无需净化.
• 固定CALB在37°C和pH值8.0时表现出最佳活性,并增强了热稳定性.
• 在九个重复使用周期后保留了~50%的活性,在8周的储存后保持了>50%.
• 鱼油的高效水解,释放EPA和DHA,证明了工业潜力.

结论:

• 索尔塔酶介导系统为酶固定提供了一个可扩展和环保的方法.
• 在*B. subtilis*上表面显示的CALB作为一个强大的,可重复使用的和恒温稳定的全细胞生物催化剂.
• 这项技术在食品,制药和营养品行业具有可持续生物加工的巨大潜力.