推进具有固有的激素性疫苗的激素测试:开发一种基于新型记者细胞的单细胞激活测试 (MAT)
Sijia Yi1, Jenny Xu1, Liping Song2
1Analytical Research and Development, Merck & Co., Inc., West Point, PA 19486, USA.
Vaccines
|October 28, 2025
概括
一种新型的报告者基于细胞的单细胞激活测试 (MAT) 提供了对传统火素测试的可靠替代方案. 这种试验通过准确检测火原体,确保药品安全,支持减少动物试验.
科学领域:
- 药品安全和药品质量控制
- 在体外诊断和测试开发.
- 免疫学和天生的免疫反应.
背景情况:
- 铁原体是药物安全的关键质量属性,通过单细胞上的托尔类受体 (TLR) 检测到.
- 传统的火素测试 (RPT) 显示出显著的变化和不准确性,特别是在复杂的疫苗中.
- 现有的体外替代品面临着捐赠者的变异性和操作复杂性的挑战.
研究的目的:
- 开发一种可靠的基于报告细胞的单细胞激活试验 (MAT) 来检测热素.
- 提供一种质量控制方法,支持动物试验中的3R倡议 (改进,减少,替代).
- 为了建立一个适合药品释放测试的可靠测试.
主要方法:
- 选人类单细胞记者细胞系与NFκB响应元素和发光记者.
- 用各种内毒素和非内毒素火原体进行刺激后的发光量化.
- 用线性,准确性,精度和强度参数验证THP-1衍生的外膜蛋白复合体 (OMPC) 的记者细胞MAT.
主要成果:
- 通过简单的发光读数,THP-1记者细胞有效地检测到广泛的火原体.
- 在OMPC测试中,MAT表现出卓越的线性 (R2 ≥0.99),准确性 (偏差在±10.3%) 和精度 (%RSD ≤6.9%).
- 该试验表现出稳定性,试验参数的故意变化的影响最小,适合常规释放.
结论:
- 报告员基于细胞的MAT测定提高了烧制性和安全性评估的一致性,可靠性和效率.
- 这些测试支持全球减少动物试验的努力,同时保持监管合规性.
- 实施MAT可以提高制药产品的质量控制.
