模块化病毒样粒子用于抗原呈现:比较基因融合和点击化学用于净化

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 疫苗开发 疫苗开发
• 蛋白质工程是指蛋白质工程.

背景情况:

• SARS-CoV-2 疫情凸显了适应性疫苗制造技术的需要.
• 病毒样粒子 (VLP) 为呈现抗原提供了一个有前途的平台.
• 乙型肝炎核心 (HBc) 抗原和SplitCore (SplCo) 技术作为VLP支架进行了研究.

研究的目的:

• 研究与抗原融合的乙型肝炎核心 (HBc) 病毒样颗粒 (VLPs) 的净化.
• 评估SplitCore (SplCo) 技术对VLP溶解性和疏水性的影响.
• 探索点击化学对VLP修饰和抗原结合的实用性.

主要方法:

• 来自Borrelia burgdorferi的外表面蛋白C (OspC) 的基因融合到HBc和SplCo.
• 在大肠杆菌中的表达,沉,溶解和交换色谱 (AEX) 用于VLP净化.
• 通过点击化学构建一种新的HBc变体,用于通过点击化学进行后翻译修改.

主要成果:

• 与HBc-OspC相比,SplCo-OspC融合显示了明显增加的溶解率 (90%) 和降低的疏水性.
• 阳离子交换染色学 (AEX) 产生了低纯度的VLP;分裂性净化后的重组没有成功.
• 一种修改后的HBc变体在解离AEX后获得了84%的VLP产量,通过点击化学成功结合光体 (高达59%).

结论:

• 结合HBc VLP和点击化学,为抗原呈现和疫苗开发提供了一个可行的策略.
• 优化脚手架装饰策略和制造流程对于每个特定抗原都至关重要.
• 该SplCo技术增强了VLP的溶解性,而点击化学允许稳定的修饰和结合.