在Bacillus subtilis中Humicola insolens Cutinase的高水平表达
Linhui Li1,2, Ruyu Sun1,2, Ying Wang3
1School of Biotechnology, Jiangnan University, 1800 Lihu Avenue, Wuxi, China.
Applied biochemistry and biotechnology
|October 30, 2025
概括
这项研究提高了Bacillus subtilis中的丁酶 (EC 3.1.1.74) 生产,达到1500U·mL-1. 这种强大的框架推动了工业规模的食品技术常规应用.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 酶学 是一种酶学.
- 微生物工程 微生物工程
背景情况:
- 丁酶 (EC 3.1.1.74) 是一种具有广泛应用潜力的氨酸酶.
- 细菌细菌是一种食品安全的宿主,具有高蛋白质分泌能力.
- 在B. subtilis中增强皮质酶表达对于工业应用至关重要.
研究的目的:
- 为了优化Humicola insolens cutinase (HIC) 在Bacillus subtilis中的表达.
- 开发一个强大的系统,用于工业规模的酸酶生产.
- 为了评估复合割酶在食品应用中的疗效.
主要方法:
- 选择B. subtilis WS9作为表达主体和pHY300PLK作为向量.
- 选了最佳促进剂,包括PamyQ',用于增强HIC表达.
- 同表达的伴侣蛋白 (PrsA,DnaK,Groe) 促进酶活性.
- 优化的发酵基和条件,以生产丁酶.
- 在3L发酵器中进行高密度发酵.
主要成果:
- 在摇瓶中达到35.00U·mL-1的初始皮质酶活性.
- 优化促进物PamyQ'的活性增加到75.85 U·mL-1 .
- 伴奏者共同表达和介质优化在摇瓶中产生了232.31 U·mL-1 .
- 高密度发酵达到1548.53U·mL-1,这是一个显著的增长.
- 复合性丁酶的疗效与番茄制品中Pichia pastoris表达的丁酶的疗效相当.
结论:
- 建立了一个高效的系统,用于在B. subtilis.中进行工业规模的Humicola insolens cutinase生产.
- 证明了工程B. subtilis在成本效益高的酶制造方面的潜力.
- 在食品技术中验证了复合性皮质酶的应用,特别是在番茄料中.
