具有成本效益的方法用于半定量分析生物样本中的可溶性内分泌物,在对抗内分泌物单克隆抗体治疗后进行

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 生物技术是生物技术.
• 血管生物学 血管生物学

背景情况:

• 溶性内分泌蛋白 (sENG) 是心脏代谢和血管疾病的关键生物标志物.
• 在临床前研究中测量治疗单克隆抗体 (mAbs) 准的生物标志物存在挑战.
• 像ELISA和质谱等现有方法在成本,特异性和专业知识方面存在局限性.

研究的目的:

• 开发一种具有成本效益和特定的西方斑点方法,用于在小鼠血中对sENG进行半定量分析.
• 为了克服传统试验中治疗mAbs常见的表位阻问题.
• 为在涉及治疗抗体的临床前研究中提供可靠的生物标志物评估方法.

主要方法:

• 开发了一种修改后的西方斑点协议,用于在小鼠血中检测sENG.
• 使用一种与代谢功能障碍相关的脂肪肝炎 (MASH) 鼠标模型,用抗内分泌素 (ENG) mAb治疗.
• 验证了使用治疗性抗ENG mAb (TRC105) 治疗的人类肝脏鼻状内皮细胞 (HHSEC) 的方法.

主要成果:

• 西方斑点方法在小鼠血中成功检测到sENG,即使存在治疗性mAbs.
• 该方法证明了特异性,并避免了阻断抗体的干扰.
• 结果可靠且可重复,提供了半定量分析.

结论:

• 开发的西方斑点方法是测量sENG和潜在的其他可溶性生物标志物的实用,经济有效的解决方案.
• 这种技术克服了ELISA和质谱学的局限性,特别是当涉及治疗mAbs时.
• 该方法促进了机制研究,并加速了临床前和临床研究中的向治疗方法的开发.