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Updated: Aug 11, 2026
10:53
Plaque Assay for Murine Norovirus
Published on: August 22, 2012
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感染力和qRT-PCR值之间的相关性,用于从冷果中检测到的小鼠诺罗病毒
Daniel Plante1, Julio Alexander Bran Barrera1, Maude Lord1
1Microbiology Laboratory, Regulatory Operations and Enforcement Branch, Health Canada, 1001 St-Laurent Street West, Longueuil, QC, J4K 1C7, Canada.
Food and environmental virology
|October 31, 2025
概括
定量逆转录PCR (qRT-PCR) 在冷果中检测出非传染性诺罗病毒. 这项研究发现,qRT-PCR中的高周期值 (Ct) 可能不表明可活病毒,因此在公共卫生风险评估中需要谨慎.
科学领域:
- 食品传播病原体监测监测
- 分子病毒学分子病毒学
- 食品安全 食品安全
背景情况:
- 人类诺罗病毒 (HuNoV) 是全球胃肠炎的主要原因,冷的果经常与疫情有关.
- 目前的监测方法,如定量逆转录PCR (qRT-PCR),无法区分传染性和非传染性病毒颗粒.
- 这种限制使得对食物传播疾病的准确风险评估变得复杂.
研究的目的:
- 为了确定通过qRT-PCR检测到的冷果上的传染性诺罗病毒的最小病毒载量.
- 建立 qRT-PCR检测极限和感染性病毒水平之间的相关性,使用小鼠诺病毒 (MNV) 作为HuNoV.的替代品.
- 为了评估ISO 15216:2017方法对冷果的加工效率.
主要方法:
- 用MNV的连续稀释对冷的树进行人工接种.
- 使用斑块检测和病毒RNA检测通过qRT-PCR根据ISO 15216:2017方法量化传染性病毒.
- 细胞培养 (斑块检测) 和qRT-PCR之间的检测极限的比较,以及从树和草中提取效率的评估.
主要成果:
- 传染性病毒 (细胞培养) 的检测极限为3.1 log PFU/25 g,而qRT-PCR检测到病毒RNA降至1.0 log PFU/25 g (Ct ≈ 36.7).
- 在检测极限之间观察到显著差异 (2-log差异),表明许多qRT-PCR阳性结果可能代表非传染性病毒基因组.
- 病毒恢复率超过了ISO 15,216的值,PCR抑制是最小的;草的恢复率与树相似.
结论:
- 在冷果上通过qRT-PCR检测到的大量诺罗病毒基因组可能与传染性颗粒不符.
- 在监测研究中,高Ct值 (例如,>35) 可能不表明存在活性的病毒.
- 将qRT-PCR结果与流行病学数据联系起来,对于准确的公共卫生决策至关重要.
