使用无矩阵校准曲线和在基于HILIC-MS的代谢学中对标准的后列输入使用极性代谢物的绝对量化

科学领域:

• 代谢学 代谢学 代谢学
• 分析化学 分析化学
• 生物标志物发现发现

背景情况:

• 极地代谢物是炎症,免疫和新陈代谢中的关键生物标志物.
• 通过水友相互作用液体染色体质谱法 (HILIC-MS) 在生物样本中的极性代谢物的准确绝对量化受到矩阵效应的阻碍.
• 稳定同位素标记的内部标准 ((SIL-) IS) 是常用的,但通常是不可用或昂贵的.

研究的目的:

• 开发和验证一种可靠的HILIC-MS方法,用于血中绝对极性代谢物量化.
• 通过使用后列注入标准 (PCIS) 来解决 (SIL-) IS 的局限性.
• 为了使准确的量化使用准确的解决方案准备的校准曲线.

主要方法:

• 水友互动液态染色学-质谱学 (HILIC-MS) 结合后列注入标准 (PCIS).
• 根据绝对矩阵效应 (AME) 值确定最佳PCIS.
• 系统评估方法性能,包括线性,精度,准确性和矩阵效应.
• 使用NIST SRM 1950等离子体进行验证,并与核磁共振 (NMR) 量化进行比较.

主要成果:

• 使用PCIS方法取得的结果与使用可用标准对分析物的 (SIL-) IS校正相当.
• 对于缺乏 (SIL-) IS.的分析物,PCIS表现优越.
• 大多数使用PCIS的无矩阵校准曲线的代谢物的高量化准确性 (80%-120%) 得到证实.
• 在研究队列中,HILIC-PCIS-MS方法与NMR量化结果一致.

结论:

• 标准的后列输入 (PCIS) 是基于HILIC-MS的极性代谢物量化 (SIL-) IS的一个有希望的,具有成本效益的替代方案.
• 这种方法对于没有可用 (SIL-) IS 的代谢物特别有益.
• PCIS提供了一个可靠的策略来纠正矩阵效应,在复杂的生物矩阵中推进定量代谢学.