使用基于ORF2特异单克隆抗体的阻断ELISA检测HEV抗体的敏感检测
Haojie Wang1, Yang Wu1, Xing Liu1
1State Key Laboratory for Animal Disease Control and Prevention, Harbin Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Harbin, China.
International journal of biological macromolecules
|November 7, 2025
概括
为检测乙型肝炎病毒 (HEV) 开发了一种新的阻断ELISA测定方法,使用向保存ORF2蛋白的单克隆抗体. 这种测试提供了广谱,交叉基因型和交叉物种检测,以改善动物传染病监测.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 诊断检测试验 诊断检测试验
背景情况:
- 肝炎E病毒 (HEV) 是一种主要的动物感染病原体,对全球健康有影响.
- 由于HEV的遗传多样性和物种变异,现有的检测方法可能面临局限性.
研究的目的:
- 开发一种用于检测乙型肝炎病毒 (HEV) 的广谱,高亲和度阻断ELISA.
- 创建一个针对保存的HEV地区的诊断工具,以改善动物感染监测和食品安全.
主要方法:
- 开发针对保存的HEV ORF2蛋白的高亲和度单克隆抗体.
- 优化阻断ELISA,使用棋盘定位和ROC曲线分析来确定切线.
- 使用特征性猪和Apodemus peninsulae血清样本验证分析,并与商业ELISA套件进行比较.
主要成果:
- 阻断ELISA在猪 (96.0%) 和Apodemus半岛 (98.0%) 的HEV检测中获得了高灵敏度和特异性.
- 该试验没有与其他常见的猪病毒 (PCV2,PRRSV) 产生交叉反应,并且与商业套件相比,显示出更高的灵敏度.
- 临床验证证实高一致性 (97.64%) 商业套件在猪和有效监测的抗体动态在动物.
结论:
- 开发的基于ORF2表位体的阻断ELISA为跨基因型和跨物种HEV检测提供了一种敏感和特定的方法.
- 这种测试对诊断,食品安全,动物感染监测和疫苗开发有价值,最大限度地减少了假阴性结果.
- 该试验有效监测不同物种的HEV抗体流行率和动态.
