用于单核RNA测序的人类干细胞衍生的移植物中隔离细胞核的协议

科学领域:

• 神经科学是一个神经科学.
• 干细胞生物学 干细胞生物学
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 单核RNA测序 (snRNA-seq) 提供大脑组织的高分辨率转录组分析.
• 了解细胞身份对于研究神经退行和神经修复至关重要.
• 人类干细胞移植对大脑修复有希望,但需要方法来评估它们的整合和功能.

研究的目的:

• 介绍一个详细的协议,以隔离细胞核从人类干细胞衍生的移植在老鼠大脑.
• 为了使这些移植的高分辨率转录基因分析 in vivo.
• 为了促进对移植组合,整合和神经元身份的评估.

主要方法:

• 协议涉及到老鼠大脑的振动组切割.
• 移植剖析和随后的核提取是关键的步骤.
• 光激活分类用于核隔离.

主要成果:

• 本次工作流程成功地将从人类干细胞移植中的细胞核分离到老鼠大脑中.
• 这种方法适合在宿主组织内分析人类神经元.
• 它支持对分离程序敏感的神经元的评估.

结论:

• 该协议提供了一种可靠的方法,用于在体内使用snRNA-seq.使用人类干细胞移植的分析.
• 它通过使移植组件的详细分析,增强了神经退行和修复的研究.
• 工作流程支持对活大脑中的移植集成和神经元功能进行全面评估.