将抗体-逆转酶融合蛋白免疫测试调整为多孔板,用于传染病抗体量化

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 测试开发 测试开发

背景情况:

• 传统的酶相关免疫吸收试验 (ELISA) 使用昂贵的设备进行抗体量化.
• 在ELISA中,的过氧化酶 (HRP) 结合抗体提供了色度测量,而不是绝对量化.
• 手持式血糖计提供了可访问,负担得起的抗体检测.

研究的目的:

• 为适应LC15抗体-逆转酶融合蛋白试验用于微波板中的高通量选.
• 为了使用负担得起的,广泛可用的血糖计来实现绝对抗体量化.
• 评估适应的LC15测定对抗SARS-CoV-2受体结合域 (RBD) 抗体检测在临床血样本中的性能.

主要方法:

• 开发了LC15,一种抗体-逆转酶融合蛋白,用于与抗体水平成比例的糖糖转化.
• 从片转换为96孔板,优化pH和试剂度.
• 在72个临床血样本中量化了抗RBD抗体,这些样本使用了微波板格式和手持血糖计.

主要成果:

• 微板尺寸保持了测试灵敏度,同时减少了5倍的试剂消耗.
• LC15试验与商业ELISA测试显示出强烈的线性相关性 (R² = 0.85),超过四个数量级.
• 绝对抗体度 (μg mL^-1) 被准确地确定,与商业ELISAs的相对标位不同.

结论:

• 经过调整的LC15试验使用可访问的葡萄糖计技术提供了准确的绝对抗体量化.
• 这种高吞吐量,具有成本效益的方法可促进人口层面的免疫查和公共卫生监测.
• 该试验显示了流行病学研究的潜力,并指导了康复性血疗法等治疗方法.