利用优化的寡核酸标记抗原组合和单细胞测序来实现人类B细胞活性的多重蛋白质基因组概况

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 一个单细胞分析.
• B细胞生物学B细胞生物学

背景情况:

• 对复杂抗原的免疫反应是异质的,涉及不同的细胞状态和表位反应.
• 单细胞测序与流细胞测量相结合,为免疫谱和细胞表型分析提供了先进的功能.
• 隔离具有特定抗原活性的罕见B细胞对于理解幽默免疫是至关重要的.

研究的目的:

• 开发和建立工作流程,使用流细胞计和单细胞测序对不同抗原有反应性的B细胞进行并行分析.
• 优化从生物样本中分离罕见的抗原特异性B细胞的方法.
• 为了能够更深入地了解B细胞克隆类型在更广泛的幽默反应中的作用.

主要方法:

• 使用流式细胞计量来精确隔离具有精细特异性的罕见B细胞.
• 采用带有寡核酸标记的抗原组件,并行隔离对多个抗原有反应性的细胞.
• 整合单细胞测序来检测标签和绘制单个B细胞的反应和表型.
• 优化新型抗原组合的抗原:链状维丁比率,并开发双标签策略.

主要成果:

• 建立了分析人类外周血液典型的抗原反应频率的工作流程.
• 确定了抗原:链状维丁比率作为新型抗原的关键优化参数,这种优化参数在SARS-CoV-2尖峰抗原中得到了证明.
• 开发了一种双标记方法 (用oligo和标记的组件),以提高染色灵敏度.
• 在自然暴露的个体中,成功地证明了对登革热反应细胞的探索性检测.

结论:

• 开发的方法使得具有不同抗原特异性的细胞能够并行分析.
• 这种方法超越了个体克隆类型的理解,让我们更好地理解它们在整体幽默反应中的作用.
• 这些发现对研究病原体,疫苗,恶性瘤和自身反应反应具有重要意义,特别是在低频抗原反应细胞和表皮质相互作用方面.