在同时量化体,乳酸盐,酸盐和TCA循环中间体的分析前考虑
Kaitlyn Berchier1, Chiara Nyffeler2, Stephen Bruce3
1University Institute of Clinical Chemistry, Inselspital, Bern University Hospital, University of Bern, Bern, Switzerland; Dr. Risch Medical Laboratory, Liebefeld, Switzerland.
Clinical biochemistry
|November 15, 2025
概括
准确的代谢物量化需要小心处理样品. -氨酸血对于体和TCA中间体是最好的,而无蛋白化全血对于乳酸/酸盐比率更好.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 临床化学 临床化学
- 代谢学 代谢学 代谢学
背景情况:
- 精确量化小代谢物,如体 (KB),酸盐 (Pyr),乳酸 (Lac) 和三碳酸 (TCA) 循环中间体,对于诊断和研究至关重要.
- 这些代谢产物是重要的能量基质和信号分子,通常通过比率来解释 (例如,Lac/Pyr).
- 分析前的挑战来自于它们的化学不稳定性和收集后快速代谢.
研究的目的:
- 开发和验证一种LC-MS/MS方法,用于同时量化KB,Pyr,Lac和TCA中间体.
- 系统地评估影响代谢物稳定性和准确性的预分析因素,包括收集管和加工.
主要方法:
- 开发用于同时定量化的LC-MS/MS方法.
- 肝素 (LH),EDTA,NaF/EDTA和NaCit收集管的比较.
- 使用高酸对去蛋白化全血 (depWB) 的评估.
- 在各种条件下 (温度,时间) 在全血和血中评估稳定性.
主要成果:
- 酸盐,乳酸盐,乙酸盐和烟酸盐的可变性高;BHB和酸盐是稳定的.
- 随着快速离心的LH血,将新陈代谢变化降到最低.
- NaF/EDTA稳定了乳酸,但影响了Pyr和TCA中间体.
- DepWB提高了Lac/Pyr比率的可靠性,但增加了可变性和矩阵效应.
- NaCit诱导了体外TCA循环中的活性.
结论:
- 抗凝剂和加工显著影响代谢物稳定性和量化准确性.
- 液血提供KB,Pyr和TCA中间体的平衡,并进行快速处理.
- 对于可靠的Lac/Pyr比率确定,DepWB是首选的,尽管变化更高.
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