蛋白酶的部分净化,特征和基因检测由来自Inasua的Lacticaseibacillus paracasei的IN17进行

科学领域:

• 微生物学 微生物学
• 酶学 是一种酶学.
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 乳酸菌 (Lacticaseibacillus paracasei) 是一种用于食品中的益生菌细菌.
• 这种株,IN17,从印尼发酵鱼中分离出来,产生细胞外蛋白酶.
• 鉴定细菌蛋白酶的特征对于了解它们的活性和潜力至关重要.

研究的目的:

• 为了净化和描述来自L. paracasei IN17的细胞外蛋白酶.
• 为了检测编码这种蛋白酶的基因.
• 为了评估蛋白质酶的特性,对潜在的应用进行评估.

主要方法:

• 在静态和动态条件下优化蛋白酶生产.
• 使用硫酸沉的酶净化.
• 酶活性的表征,包括最佳pH值,温度,金属离子效应和抑制剂.
• 通过PCR和凝电泳检测蛋白酶编码基因 (prtP).

主要成果:

• 静态化产生更高的蛋白酶特异性活性 (0.137 U/mg) 比动态 (0.054 U/mg).
• 在20%的硫酸和度下,蛋白酶纯度达到7.36.
• 在pH 7 (原始) 和pH 6 (纯化) 时观察到最佳活性,最佳温度为30°C.
• 蛋白酶是一种金属蛋白酶,由Mn辅因子激活,并由EDTA抑制.
• 蛋白酶编码基因 (prtP) 被成功放大了 (~685 bp).

结论:

• L. paracasei IN17产生一种具有特定活动和特征的金属蛋白酶.
• 净化和基因识别为进一步研究和应用提供了基础.
• 这项研究有助于了解益生菌酶的功能和潜在的生物技术用途.