开发一种从重组流体中净化lentivirus的过程,使用类亲缘关系连接体
Eduardo Barbieri1,2, Gina N Mollica1, Sobhana A Sripada1
1Department of Chemical and Biomolecular Engineering North Carolina State University Raleigh North Carolina USA.
Bioengineering & translational medicine
|November 17, 2025
概括
新的基于的亲和树脂和膜可以有效地净化基因疗法的lentiviral载体 (LVVs). 这一进步改善了LVV的隔离,为治疗应用提供了更高的容量和生产率.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 基因治疗 基因治疗
- 过程开发 过程开发
背景情况:
- 病毒载体 (LVV) 对基因和细胞疗法至关重要,但可扩展的净化方法有限.
- 现有的LVV净化依赖于亲和性联体,特别是对于囊性口腔炎病毒G (VSV-G) 蛋白质伪型载体.
- 驼体抗体连接物以前曾被使用过,但基于的连接物提供了一种新的方法.
研究的目的:
- 为LVV净化开发和评估使用VSV-G向的新型亲和树脂和膜.
- 在LVV隔离中优化结合能力,生产力和宿主细胞污染物去除.
- 为治疗应用建立一个多步LVV净化过程.
主要方法:
- 开发具有多种材料和结构性质的类功能化亲和树脂和膜.
- 对结合能力,生产力和污染物去除效率的评估.
- 实施和评估包括澄清,亲和度捕获,抛光和过在内的四步净化过程.
主要成果:
- 用质功能化的树脂和膜显示出高容量 (高达5 × 10 9 TU/mL) 和生产力 (高达2.9 × 10 9 TU/mL/min).
- 实现了传导LVVs的实质性丰富,并显著减少宿主细胞污染物 (110-170倍).
- 这四个步骤的过程产生了33%-46%的LVV恢复,其残留宿主细胞蛋白质水平低于5ng/mL.
结论:
- 基于的亲和色谱为LVV净化提供了高效和可扩展的解决方案.
- 开发的树脂和膜显著提高了LVV隔离效率和纯度.
- 这种净化策略支持基于LVV的基因和细胞疗法的进步.
