通过Aptamer辅助DNA-PAINT对氧化DNA损伤的单细胞超分辨率量化.
Jingfang Zhao1, Liu Liu1, Yunpeng Song1
1College of Chemistry and Molecular Sciences, State Key Laboratory of Metabolism and Regulation in Complex Organisms, College of Life Sciences, Taikang Center for Life and Medical Sciences, Wuhan University, Wuhan 430072, China.
Analytical chemistry
|November 18, 2025
概括
研究人员开发了一种超高分辨率成像方法,以精确量化单细胞中氧化DNA损伤 (8-oxo-dG). 这种技术为研究DNA修复和药物效应提供了卓越的特异性和效率.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 生物物理学的生物物理.
- 细胞成像 细胞成像
背景情况:
- 在单细胞水平上量化氧化DNA损伤与传统方法相比具有挑战性.
- 整体测定模糊了细胞对细胞的变异性,缺乏分子特异性.
- 8-oxo-dG是氧化应激和DNA损伤的关键标志物.
研究的目的:
- 开发一种超高分辨率成像策略,用于精确,单细胞量化8-oxo-dG.
- 克服现有方法在特异性和分辨率方面的局限性.
- 允许在单细胞水平上直接评估DNA修复机制和药物疗效.
主要方法:
- 开发了一种超高分辨率的成像策略,将一个8oxo-dG特定的DNA吸收体与DNA-PAINT.PAINT结合起来.
- 实现了~22nm的空间分辨率,用于在单个细胞中可视化8-oxo-dG病变.
- 使用该方法来评估hOGG1及其突变的修复效率.
主要成果:
- 成功可视化和量化了具有高空间分辨率的8oxo-dG病变.
- 与基于抗体的方法相比,证明了更高的特异性和标记效率.
- 启用直接,单细胞评估DNA修复效率,独立于转染变异性.
结论:
- 开发的DNA-PAINT阿帕特马策略为单细胞氧化DNA损伤量化提供了一个强大的工具.
- 这种方法有助于精确评估DNA修复动态和治疗剂的影响.
- 该平台可适应在核酸中绘制其他小分子目标,以单细胞精度.
