通过消耗细胞内标记的死细胞来改善T细胞表面基因
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|November 19, 2025
概括
改善血蛋白质组学需要解决细胞内蛋白质污染问题. 生物化后的死细胞枯竭显著提高了血膜蛋白质的识别和准确性.
科学领域:
- 蛋白质组学是指蛋白质组学.
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 血膜 (PM) 蛋白对于细胞功能和治疗向至关重要.
- 由于污染,目前的蛋白质组方法难以准确捕获PM蛋白质.
- 细胞表面生物化是一种常见的丰富技术,但受到高细胞内蛋白质污染的影响.
研究的目的:
- 为了确定细胞表面生物化中细胞内蛋白质污染的来源.
- 开发一种方法来减少污染并改善等离子体膜蛋白质组学.
- 评估死细胞枯竭对血蛋白识别和准确性的影响.
主要方法:
- 通过使用氨基胺反应试剂,研究了不可活性的细胞的细胞内标记.
- 实施了Annexin V染色和生物化后死亡细胞的消耗.
- 分析了等离子体膜蛋白丰富度,数和iBAQ强度在死亡细胞耗尽之前和之后.
- 检查了CD11a和CD18的未成熟ER/Golgi糖形的变化.
主要成果:
- 虽然不可活性的细胞占很小的百分比,但占标记蛋白质的很大比例.
- 死亡细胞耗尽删除了~99%的细胞内标记细胞.
- 在死细胞耗尽后,血膜蛋白强度从4%增加到55.8%.
- 观察到细胞内,特别是核蛋白质的大量耗尽.
- 发生了CD11a和CD18未成熟的ER/Golgi糖形的选择性去除.
结论:
- 非活性的细胞的细胞内标签是表面丰富污染的主要原因.
- 死细胞消耗是减少污染和改善血膜蛋白质组学的有效策略.
- 这种方法提高了血蛋白识别的灵敏度和准确性.


