建立和应用一种RPA-LFD双重快速检测方法,用于沙门氏菌Pullorum和沙门氏菌Enteritidis
Can Wang1,2, Tingting Zeng1, Houxun Ya1
1Guangxi Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Guangxi Veterinary Research Institute, Nanning, China.
PloS one
|November 19, 2025
概括
一种新的双重重组合聚合酶放大 (RPA) 与侧向流量测量棒 (LFD) 方法快速检测家禽中的沙门氏菌和沙门氏菌. 这种简单的视觉测试提供了早期诊断,以改善群体健康和食品安全.
科学领域:
- 兽医诊断 兽医诊断 兽医诊断 兽医诊断
- 分子生物学分子生物学
- 食品安全 食品安全
背景情况:
- 沙门氏菌种类显著影响家禽生产和食品安全.
- 沙门氏菌 (S. Pullorum) 和沙门氏菌 (S. Enteritidis) 是导致家禽感染的关键血清型.
- 快速准确的诊断对于早期干预和控制至关重要.
研究的目的:
- 开发一种快速,灵敏和特定的方法,同时检测S. Pullorum和S. Enteritidis.
- 为兽医环境和现场测试提供早期诊断工具.
主要方法:
- 开发一种针对特定基因的双重复合聚合酶放大 (RPA) 试验 (S. Pullorum 的 traJ,S. Enteritidis 的 Sdf I).
- 整合RPA与侧向流量计 (LFD) 进行视觉检测.
- 优化起料/探头选和反应条件.
主要成果:
- 双RPA在37°C的温度下在15分钟内成功放大了目标DNA.
- 联合RPA-LFD方法在20分钟内实现了视觉检测.
- 对于S.Pullorum的检测极限为1.56 × 102 CFU/mL,对于S.Enteritidis的检测极限为1.38 × 102 CFU/mL,证明了高灵敏度.
- 该方法显示高特异性,没有对其他常见病原体的交叉反应.
- 临床样本的结果与细菌学分析手册 (BAM) 方法完全相关.
结论:
- 开发的双RPA-LFD测定是一种简单,快速,特定和高度敏感的方法,用于同时视觉检测S. Pullorum和S. Enteritidis.
- 这种方法作为一级兽医实验室和野外测试的宝贵技术参考.
- 早期和准确的诊断可以显著减轻家禽生产损失,提高食品安全.
