基于细胞的重组绿色光蛋白测试系统的开发,用于对病毒蛋白酶抑制剂的普遍发现
Yan Feng1, Xiaoyan Wu2, Ruiting Chen2
1Zhejiang Key Lab of Vaccine, Infectious Disease Prevention and Control, Department of Microbiology, Zhejiang Provincial Center for Disease Control and Prevention, Hangzhou 310015, China.
ACS pharmacology & translational science
|November 20, 2025
概括
一种使用重组绿色光蛋白 (GFP) 的新型基于细胞的测定方法使得病毒蛋白酶抑制剂的高通量查成为可能. 这种安全有效的方法通过检测细胞中的蛋白酶活性来加速新型抗病毒药物的发现.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 药物发现 药物发现 药物发现
背景情况:
- 病毒蛋白酶对于病毒复制至关重要,并且是抗病毒药物开发的关键标.
- 现有的蛋白酶抑制剂选方法通常需要高的生物安全水平或缺乏细胞相关性,阻碍有效的药物发现.
研究的目的:
- 开发一种新的基于细胞的测试系统,用于对病毒蛋白酶抑制剂进行高通量查.
- 建立一个安全有效的平台,用于识别针对病毒蛋白酶的潜在抗病毒化合物.
主要方法:
- 使用重组绿色光蛋白 (GFP) 技术开发DIFF重组绿色光蛋白 (DIFF-rGFP) 测定系统.
- 重组绿色光蛋白 (rGFPs) 的构建与蛋白质酶分裂序列用于检测蛋白质酶活性.
- 使用严重急性呼吸道综合征冠状病毒-2 (SARS-CoV-2) 3-甲基像蛋白酶 (3CLpro) 作为模型系统来验证试验的性能.
主要成果:
- DIFF-rGFP试验在抑制剂作用时显示光强度增加,表明成功检测了蛋白酶抑制.
- 该试验使用已知的SARS-CoV-2 3CLpro抑制剂 (GC376和恩西特雷尔维尔) 进行了验证,证实了其适用于抑制剂查的适用性.
- 该方法消除了对高生物安全性实验室的需求,为蛋白酶抑制剂查提供了更安全的替代方案.
结论:
- DIFF-rGFP测试是一种安全,高效和可靠的基于细胞的平台,用于选病毒蛋白酶抑制剂.
- 这种新型试验有可能通过提供高通量和细胞相关的查方法来加速抗病毒药物发现.
