彗星测试在先进的体外模型中的应用
Elise Rundén-Pran1, Naouale El Yamani1, Sivakumar Murugadoss1
1Health Effects Laboratory, Department of Environmental Chemistry and Health Effects, The Climate and Environmental Research Institute NILU, Kjeller, Norway.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
|November 22, 2025
概括
彗星测定有效地测量先进细胞模型中的DNA损伤,支持化学安全评估的新方法方法 (NAMs). 这种方法有助于减少用于基因毒性查的动物试验.
科学领域:
- 毒理学和生态毒理学
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 彗星测定 (单细胞凝电泳) 是一种验证的DNA损伤评估方法.
- 在化学风险评估中,越来越需要使用非动物试验方法,与3Rs原则保持一致.
- 先进的细胞模型,包括3D培养和共同培养,为毒性测试提供了更具生物相关性的系统.
研究的目的:
- 为了证明彗星测定在各种先进的体外细胞模型中的适用性.
- 描述用于检测不同类型的DNA损伤的标准性彗星试验 (ACA) 和酶链彗星试验 (ELCA).
- 提供关于实验设计的指导和使用这些先进模型进行基因毒性测试的关键考虑.
主要方法:
- 彗星测定适应先进的体外模型 (3D培养,共同培养,空气-液体接口).
- 应用标准性彗星测定 (ACA) 检测DNA链断裂和酶链彗星测定 (ELCA) 检测基因改变,使用病变特异性内核酶.
- 包括方法考虑,实验设计和细胞毒性测试.
主要成果:
- 彗星测试适用于肝脏,肺,乳房,肠道,皮肤和大脑的先进模型.
- 在这些复杂的模型中,ACA和ELCA修改都有效检测DNA损伤.
- 提供了标准的2凝和12凝幻灯片格式的协议,解决了关键评估点.
结论:
- 彗星测试对先进的细胞模型的适应,代表了基因毒性测试的重大进展.
- 这些先进的模型为DNA损伤和修复评估提供了更多生物相关的背景.
- 这种方法支持下一代风险评估 (NGRA) 以开发更安全的化学品并为政策提供信息.
