来自Trichomonas vaginalis的NTPDase 4的重组表达和核酸水解活性
Magno Sinval Pereira Ribeiro1, Laura Cipolatto da Rosa2, Giulia Bongiorni Galego3
1Centro de Biotecnologia, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil; Faculdade de Farmácia, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil; Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil.
Enzyme and microbial technology
|November 23, 2025
概括
在Trichomonas vaginalis核酸三酸二基酸酶 (TvNTPDase4) 的表达和净化过程中. 活性酶将ATP,ADP和AMP水解,显示出在治疗三病的生物技术应用的潜力.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 寄生虫学的寄生虫学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 阴道三虫 (Trichomonas vaginalis) 引起三病,这是一个普遍存在的性传播感染.
- 了解寄生虫生物化学有助于开发治疗和诊断.
- 核三酸二酸酶 (NTPDases) 对于像T. vaginalis.这样的寄生虫中的纯素代谢至关重要.
研究的目的:
- 为了表达和描述来自T. vaginalis的TvNTPDase4酶.
- 为了研究它的酶活性,基质特异性和抑制.
- 探索其生物技术应用的潜力.
主要方法:
- 在大肠杆菌中TvNTPDase4的重组表达.
- 使用ATP,ADP和AMP进行酶活性测定.
- 用加多和AMPCP进行抑制研究.
- 分子动力学模拟.分子动力学模拟.
- 在HMVII细胞上进行细胞毒性测定.
主要成果:
- 纯化的rTvNTPDase4显示对ATP,ADP和AMP的活性.
- 加多和AMPCP抑制了酶活性,对ATPase/ADPase和AMPase功能有不同的影响.
- 分子动力学揭示了通过与阿皮拉酶保留区域 (ACR1和ACR4) 的相互作用的基质水解.
- 在T. vaginalis中没有发现ecto-5'-核酶 (E-5'-N) 序列.
- 该酶对HMVII细胞没有细胞毒性.
结论:
- 表达和净化的rTvNTPDase4是酶活性和功能性的.
- TvNTPDase4在纯素代谢中发挥作用,对于T. vaginalis的生存至关重要.
- 该酶具有生物技术应用的潜力.
- 在T. vaginalis中,可能缺乏ecto-5'-核酸酶.
