接口敏感的Epi-Coherent抗冲击Raman散射显微镜用于成像细胞粘附动力学

科学领域:

• 生物物理学的生物物理.
• 细胞生物学 细胞生物学
• 化学成像技术 化学成像技术

背景情况:

• 了解细胞粘附对于细胞迁移和细胞外矩阵相互作用至关重要.
• 传统的显微镜方法缺乏化学特异性,或者需要光标签进行界面研究.

研究的目的:

• 开发一种无标签显微镜技术,用于研究在接口处的细胞粘附动态.
• 通过使用epi-CARS.研究细胞基质相互作用和脂质滴的精确可视化.

主要方法:

• 使用聚焦于接口的同质性连性抗斯托克斯拉曼散射 (epi-CARS) 显微镜.
• 在对焦式的epi-CARS系统中加入了一个针孔,以拒绝失焦的反射.
• 应用该方法研究了线粒细胞和线粒细胞后细胞的细胞基质粘附动态.

主要成果:

• 埃皮-CARS证明了固有的界面选择性,在附着区域具有负对比,精确测量细胞基质距离.
• 该技术在反向显微镜配置中为细胞脂质滴提供了高对比度.
• 观察到粘附部位在线粒分裂期间分裂,并在线粒分裂后传播期间向外发展.
• 具有明显的粘附模式和水层厚度的特征,在细胞边缘前进和收缩的细胞边缘.

结论:

• 荷莫丁epi-CARS显微镜是一种强大的无标签工具,用于界面细胞生物学.
• 该方法可以精确的纳米图像细胞粘附和脂质动态.
• 揭示了细胞分裂和扩散期间细胞粘附的动态变化,以前所未有的细节.