构成Rax-Cre转基因驱动器的直接比较,这些驱动器在小鼠胚胎眼场中激活
Nadean L Brown1, Samuel Goodyear-Brown2, Sabine Fuhrmann2,3
1Department of Cell Biology & Human Anatomy, University of California, Davis, CA.
bioRxiv : the preprint server for biology
|November 24, 2025
概括
两种Cre小鼠系Rx3-Cre和Rax-Cre BAC Tg被比较,以了解它们在眼睛早期发育中的活性. Rax-Cre BAC显示出更准确的表达,而Rx3-Cre则具有异位活动,这凸显了视力研究中需要仔细选择模型的必要性.
科学领域:
- 发展生物学 发展生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
- 眼科医生 眼科 眼科
背景情况:
- 拉克斯/Rx基因对眼睛早期发育至关重要,其表达模式指导视网膜前代和眼睛结构的发展.
- 构成Cre复合酶转基因小鼠系,如Rx3-Cre和Rax-Cre BAC Tg,是研究眼睛发育过程中基因功能的重要工具.
- 了解这些Cre驱动器的精确活动对于精确的血统追踪和视觉研究中的基因操纵至关重要.
研究的目的:
- 系统地比较两个常用的构成性转基因小鼠线的产前眼部和眼外Cre活动:Rx3-Cre和Rax-Cre BAC Tg.
- 评估这些Cre驱动器在胚胎和产后眼睛发育期间回顾内源RAX表达模式的忠实性.
- 识别潜在的非目标Cre活动,这些活动可能会混视觉研究中的实验结果.
主要方法:
- 在Rx3-Cre或Rax-Cre BAC转基因雄性小鼠与Cre依赖的谱系追踪器Ai9/tdTomato交配.
- 在多个发育阶段的活体和固定组织中对tdTomato表达的评估,从光囊阶段开始.
- 使用数字成像分析整个胚胎和免疫标记的冷切割材料.
主要成果:
- Rx3-Cre在周期性介质体 (POM) 中表现出异位Cre活性,包括表达PITX2和PECAM-1的子群,以及潜在的生殖线表达.
- Rax-Cre BAC小鼠驱动器在胚胎和产后眼睛中准确地重复了内源性RAX表达,在发育的四肢中只有轻微的宫外活性.
- 这两种驱动因素都被评估为它们在光囊和光杯发育的关键阶段重复RAX表达模式的能力.
结论:
- 与Rx3-Cre相比,Rax-Cre BAC驱动程序提供了更准确的内源RAX表达的回顾,使其成为研究眼睛发育的首选工具.
- 宫外Cre活动,特别是在Rx3-Cre线上观察到的,可能导致不准确的血统追踪,需要仔细的实验设计.
- 这些发现强调了谱系报告的重要性,包括在使用条件向策略时,在使用条件向策略时,在使用条件向策略时,在使用条件向策略时,包括缺乏Cre转基因的对照 littermates.
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