从人类多形质母细胞瘤 (GBM) 组织中分离和流动细胞计分析自然杀手细胞

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 神经瘤学神经瘤学
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 多形质母细胞瘤 (GBM) 是一种具有复杂瘤微环境的侵袭性脑瘤.
• 了解免疫细胞,如自然杀手 (NK) 细胞在GBM瘤微环境中的作用,对于开发有效疗法至关重要.

研究的目的:

• 建立一个可复制的协议,用于从新切割的人类GBM组织中分离和分析可行的NK细胞.
• 提供与各种下游应用程序兼容的工作流,包括流细胞计,细胞分类和单细胞RNA测序.

主要方法:

• 开发了一种涉及组织解离,单核细胞丰富和红细胞溶解的多步骤协议.
• 利用流式细胞计测进行染色和采集,以识别瘤透NK细胞.
• 包括用于纯机械解离和用于流细胞计的面板分割的替代方案.

主要成果:

• 从GBM组织中成功分离了可行的单细胞悬浮物.
• 该协议产生了适合下游分子和功能分析的高质量细胞.
• 在瘤组织内通过流式细胞计测证明NK细胞的识别.

结论:

• 本方案提供了一种可靠的方法来研究GBM中的NK细胞.
• 这种标准化的方法有助于进一步研究NK细胞功能和质母细胞瘤的治疗潜力.