开发使用CRISPR/AapCas12b侧流带基于病毒大囊蛋白基因B646L的非洲猪瘟病毒视觉检测

科学领域:

• 兽医病毒学 兽医病毒学
• 分子诊断学 分子诊断
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 非洲猪瘟 (ASF) 是由非洲猪瘟病毒 (ASFV) 引起的严重出血性疾病,导致猪的高死亡率.
• 目前的诊断方法,如PCR和ELISA,由于设备和时间限制,对现场应用有局限性.
• 快速而准确的ASFV检测对于有效的疾病控制和预防战略至关重要.

研究的目的:

• 为非洲猪瘟病毒 (ASFV) 开发一种快速,精确和现场部署的诊断方法.
• 将CRISPR/AapCas12b技术与侧流带 (LFS) 技术相结合,用于视觉检测ASFV.
• 针对保存的B646L基因,该基因编码ASFV的主要囊蛋白p72.

主要方法:

• 开发一个与侧流带 (LFS) 技术集成的CRISPR/AapCas12b系统.
• 针对B646L基因进行ASFV检测.
• 使用临床样本验证试验的灵敏度,特异性和与实时PCR一致性的验证.

主要成果:

• 该CRISPR/AapCas12b-LFS平台在一小时内实现了对B646L基因检测的6个副本/μL的敏感性.
• 该试验表明对常见的猪病原体 (PRRSV,CSFV,PRV,PPV4,PCV3) 的高特异性.
• 在34个临床标本中,开发的测定和实时PCR结果之间观察到完全一致.

结论:

• 开发的CRISPR/AapCas12b-LFS方法是一种敏感,特定和实用的现场诊断工具,用于ASFV检测.
• 这种方法对非洲猪瘟的实地监测和控制有很大的潜力.
• 测试的视觉和快速性质克服了在现场环境中传统诊断技术的局限性.