基于伪病毒的中和测试作为可定制和可扩展的工具用于血清监测和免疫分析
Caio Bidueira Denani1,2, Bruno Pimenta Setatino1, Denise Pereira1
1Laboratório de Análise Imunomolecular, Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos (Bio-Manguinhos), Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro 21040-360, Brazil.
Pathogens (Basel, Switzerland)
|November 27, 2025
概括
基于伪病毒的中和分析为测量SARS-CoV-2中和抗体的传统方法提供了可扩展和可重复的替代方案. 这些测试有效地追踪疫苗反应,并揭示了针对Omicron变体的中和活性显著降低,表明抗体减弱.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 测试开发 测试开发
背景情况:
- 中和抗体 (nAbs) 对于评估SARS-CoV-2保护和疫苗疗效至关重要.
- 减少斑块的中和试验 (PRNT) 是黄金标准,但缺乏高通量能力.
- 需要有效和可扩展的方法来监测人口免疫力和疫苗反应.
研究的目的:
- 为了标准化和比较内部和商业的基于伪病毒的中和 (PBN) 试验与黄金标准PRNT.
- 评估SARS-CoV-2的PNN试验的性能,可重现性和可扩展性.
- 使用PBN. 在接种疫苗的人群中对不同SARS-CoV-2变异的免疫反应进行分析.
主要方法:
- 开发并标准化了使用VSV-ΔG伪病毒 (武汉,Omicron BA.1) 和NanoLuc报告员的内部PBN试验.
- 使用商业PBN试验 (整体分子) 与晶状病毒伪病毒 (武汉,Omicron XBB.1.5/XBB.1.9) 和GFP/Renilla记者.
- 将PBN测定与PRNT进行比较,使用来自不同时间点的600个接种疫苗的血清样本.
主要成果:
- 两种PNN试验都与PRNT有很强的相关性,而商业试验显示出更高的可重复性和可扩展性.
- 公司内部的PBN测定提供了一个具有成本效益的,与BSL-2兼容的替代方案.
- 大规模分析显示,武汉和Omicron XBB变种之间中和的显著差异,与Omicron相比减少了大约八倍.
- 鉴定了抗体减弱和抗原漂移,并使用k-means集群对响应者进行分类.
结论:
- 标准化的PNN测试为SARS-CoV-2中和测试提供了一个强大的和可扩展的框架.
- PBN测定适用于大规模免疫监测,疫苗反应监测和跟踪病毒演变.
- 这些测试有助于对免疫反应进行分类,并突出显示病毒变异对中和抗体活性的影响.
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