构建和应用MS2菌体病毒样颗粒用于SARS-CoV-2检测,使用单质粒系统
Mengjie Liang1, Yongxin Li1, Jingyuan Yang1
1Department of Medical Laboratory, Hospital of Xinjiang Production and Construction Corps/Second Affiliated Hospital of Shihezi University School of Medicine, No. 232, Qingnian Road, Tianshan District, Urumqi, Xinjiang 830002, China; Bingtuan Clinical Medical Research Center for Medical Laboratory, No. 232, Qingnian Road, Tianshan District, Urumqi, Xinjiang 830002, China.
Journal of microbiological methods
|November 27, 2025
概括
研究人员开发了MS2菌体病毒样颗粒 (VLPs) 作为RNA病毒检测的阳性对照. 这种标准化控制在多个商业SARS-CoV-2核酸检测套件中显示出一致的性能.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 病毒学 病毒学
- 诊断 诊断 诊断 诊断
背景情况:
- 关于MS2菌体病毒样颗粒 (VLPs) 与商业RNA病毒检测套件的兼容性研究有限.
- 分子诊断质量控制系统的标准化对于可靠的RNA病毒检测至关重要.
研究的目的:
- 使用MS2菌体VLPs构建RNA病毒核酸检测的阳性控制.
- 评估这些VLP与商业核酸检测套件的兼容性.
主要方法:
- 产生了表达MS2细菌蛋白和SARS-CoV-2向基因的重组质粒.
- 从大肠杆菌 (Escherichia coli) 抽出和净化MS2的VLP.
- 以大小,均性,稳定性和核酶抵抗性来表征VLP.
- 验证了与五个商业SARS-CoV-2核酸检测套件的检测兼容性.
主要成果:
- 成功生成了携带SARS-CoV-2目标基因的MS2 VLP (23-28 nm大小,1.99 × 10^10副本/μL).
- 在4°C下,VLPs表现出优异的核酶抗性,同质性和稳定性,持续时间≥20天.
- 阳性对照在所有五个商业套件中都表现出一致的检测性能.
结论:
- 携带目标基因的MS2菌体VLP作为RNA病毒检测的实际积极控制.
- 这种基于VLP的控制适用于分子诊断中的质量控制标准化.
- 开发的阳性对照支持常规的实验室工作流程,并提高诊断可靠性.
