一个精简的高性能液体染色学与并联质谱基于工作流程,用于快速选小分子细胞积累的小分子
Alina Metzen1,2, Katharina Rox1,2
1Department of Chemical Biology, Helmholtz Centre for Infection Research (HZI), Inhoffenstraße 7, 38124, Braunschweig, Germany.
确定细胞内化合物积累是药物开发的关键. 这项研究优化了用于高通量查的细胞积累试验,使得可以准确量化具有细胞内标的候选药物.
科学领域:
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
- 药物发现 药物发现 药物发现
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 评估细胞内化合物积累对于开发针对细胞内途径的药物至关重要.
- 标准的透性测定不能完全反映细胞吸收和细胞内药物处置.
研究的目的:
- 开发和优化一个中高通量细胞积累试验在96井格式.
- 为了建立可靠的细胞内度定量,以细胞内标的化合物.
主要方法:
- 评估了六种不同化合物的最佳条件,包括化时间,化合物度和提取协议.
- 利用高性能液态色谱与双重质谱 (HPLC-MS/MS) 进行敏感的量化到纳米分子 (nM) 水平.
- 在A549ACE+TMPRSS2细胞中,每个细胞计数中确定细胞内度,考虑非特异性结合.
主要成果:
- 在短短1小时的潜伏期内,对6种化合物进行了细胞积累的可靠量化.
- 证明最佳测定条件,包括化时间和提取,根据化合物化学类而异.
- 确定的细胞内度每细胞计数,考虑非特异性结合,以进行准确的评估.
结论:
- 优化的测定条件对于基于细胞内度的体外和体外药物活性预测至关重要.
- 开发的工作流程支持化合物的预选和系统的优化,以推进具有细胞内标的候选药物.
- 这种方法为药物开发的早期阶段提供了有价值的数据,涉及细胞内标.
更多相关视频
07:34Large Scale Non-targeted Metabolomic Profiling of Serum by Ultra Performance Liquid Chromatography-Mass Spectrometry UPLC-MS
Published on: March 14, 2013
09:04Identifying Per- and Polyfluorinated Chemical Species with a Combined Targeted and Non-Targeted-Screening High-Resolution Mass Spectrometry Workflow
Published on: April 18, 2019
相关概念视频
Tandem Mass Spectrometry
Peptide Identification Using Tandem Mass Spectrometry
This technique helps gather information regarding the protein from which the peptide was obtained and to study the peptides’ amino acid sequence. Identifying peptides from a complex mixture is an important component of the growing field of...
High-Performance Liquid Chromatography: Introduction
In HPLC, two phases play a critical role in the separation process:
High-Performance Liquid Chromatography: Types of Detectors
Mass Spectrometry: Complex Analysis
GC–MS is a powerful hyphenated method commonly used in forensics and environmental...
