针对单细胞ICP-MS的特定部位的结合抗体元素标签
Haowen Hu1, Zhengxian Lv2, Yixin Guo1
1Department of Chemistry and the MOE Key Laboratory of Spectrochemical Analysis & Instrumentation, College of Chemistry and Chemical Engineering, Xiamen University, Xiamen, 361005, China.
Talanta
|December 9, 2025
概括
我们开发了一种无痕,特定于位点的抗体元素标记 (AET) 策略,用于高度敏感的感应合等离子体质谱 (ICP-MS) 生物分析. 这种方法提高了抗体性能和定量单细胞检测.
科学领域:
- 生物分子分析.
- 分析化学是一种分析化学.
- 纳米技术纳米技术
背景情况:
- 对于ICP-MS的传统抗体元素标签 (AET) 由于随机修饰而遭受结构异质,影响结合亲和力和特异性.
- 这种异质性限制了基于ICP-MS的生物分子检测的分析性能和灵敏度.
- 需要统一和稳定的AET来改善定量生物分析.
研究的目的:
- 开发一种无痕迹,特定于位点的结合策略,用于创建统一的抗体元素标签 (AET).
- 提高AETs对ICP-MS的结合亲和力,特异性和分析性能.
- 为了实现高度敏感和定量单细胞生物分析.
主要方法:
- 开发了一种无痕,特定于位点的结合策略,将单链DNA (ssDNA) 连接到IgG抗体的K248残留物.
- 利用ssDNA作为与载有欧 (Eu) 的MS2体纳米粒子混合的链接器,作为信号放大器.
- 通过将精确的抗体修饰与高容量的MS2元素载体集成,创建了特定站点的AET (ssAET).
主要成果:
- 开发的ssAETs表现出异常的结构统一性,稳定性和灵敏性.
- 使用人类表皮生长因子受体2 (HER2) 作为模型,证明了卓越的特异性和定量性能.
- 与随机结合抗体相比,实现了1.8倍更强的单细胞信号,并标记了1.5倍多的HER2阳性细胞.
结论:
- 无痕迹,特定站点的ssAET平台为生物分析提供了一种多功能和精确的方法.
- 这一策略显著提高了使用ICP-MS的单细胞分析的灵敏度和定量性能.
- 该方法保留了原生抗体结构和结合活性,克服了传统AETs的局限性.
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