一个简化的序列丰富策略,用于从低微克的样品多PTM选

科学领域:

• 蛋白质组学是指蛋白质组学.
• 生物化学 生物化学
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 翻译后修改 (PTMs) 调节蛋白质功能,并与人类疾病有关.
• 从有限的生物样本同时分析多个PTM类型是具有挑战性的,因为低静脉测量和样本损失.

研究的目的:

• 开发一种简化,顺序的丰富策略,用于从微尺度样本同时进行多PTM分析.
• 为了使N-糖蛋白质组,蛋白质组,无处不在蛋白质组和全球蛋白质组的综合分析.

主要方法:

• 集成的HILIC珠子用于N-glycopeptides,Ti4+-IMAC珠子用于phoshopeptides,K-ε-GG抗体用于ubiquitinated,以及C18膜用于全球蛋白质组分析.
• 优化了过程,以最大限度地减少样品损失,简化操作,减少时间.

主要成果:

• 从微克尺度的人类胚胎脏293T三性中成功鉴定出数千个N-葡萄糖酸盐,酸盐和K-ε-GG位点.
• 证明了高灵敏度,即使在1μg的输入中也能识别出许多位点.
• 在复杂的矩阵上验证了该策略,例如小鼠组织和人体血.

结论:

• 开发的多PTM分析策略对不同PTM的同时分析具有敏感性和效率.
• 这种方法对PTM交叉语音研究和生物标志物发现有前途,特别是在宝贵的临床样本上.