切片克服了细菌细胞壁障碍,使光in situ杂交
Jennifer Gundrum1, S Tabita Ramirez-Puebla1, Jessica L Mark Welch1
1ADA Forsyth Institute, Somerville, Massachusetts, USA.
Microbiology spectrum
|December 10, 2025
概括
这项研究引入了一种新的方法,通过嵌入和切割样本来可视化生物膜中的所有细菌. 这种技术克服了细胞壁的障碍,改善了复杂微生物群落中的细菌可视化.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 使用光在位杂交 (FISH) 在多微生物生物膜中同时可视化所有细菌物种具有挑战性.
- 细菌的细胞壁,特别是格拉姆阳性细菌的细胞壁,作为探针透的障碍.
- 现有的酶方法可以透阳性细菌,但会导致阳性细菌的损失或破坏,阻碍同时可视化.
研究的目的:
- 开发一种通用协议,同时可视化微生物群体内的所有细菌.
- 为了在杂交过程中保留生物膜的微型架构.
- 为了克服阻碍有效地进行in situ杂交的细胞壁障碍.
主要方法:
- 将细菌生物膜嵌入到一个共交联的甘醇甲基烯酸树脂中.
- 在甲基酸盐还在原位时切割嵌入样本.
- 在切割材料上进行光 in situ 杂交 (FISH).
主要成果:
- 开发的程序可以使难以杂交的细菌,包括格拉姆阳性种群的杂交.
- 整个生物膜的微观架构在整个过程中被保留.
- 与标准的全细胞安装程序相比,观察到平均信号强度和杂交均性的显著改善.
结论:
- 细菌细胞壁是有效地在整体样本中进行in situ杂交的主要障碍.
- 通过切割切割细菌细胞的物理切割克服了细胞壁障碍.
- 该协议为可视化多微生物群落中的所有细菌提供了一种通用方法,有利于微生物学研究.
关键词:
格拉姆阳性细菌是什么?细胞壁上的细胞壁.同焦点显微镜的共焦显微镜.光在现场混合化光.影像成像技术 影像成像技术微生物生态学 微生物生态学聚微生物生物膜是一种多微生物生物膜.切割的切割方法 切割的切割方法更多相关视频
相关概念视频
02:07FISH - Fluorescent In-situ Hybridization
23.7K
Fluorescence in situ hybridization, or FISH, was developed in the early 1980s and has quickly become one of the most widely used techniques in cytogenetics. Labeled probes are used to bind complementary DNA or RNA sequences on a chromosome or in a region within a cell. Earlier, the probes could only be obtained by cloning or reverse transcription of a DNA template. Currently, the probe oligonucleotides can be synthesized synthetically. Additionally, with the advancement of optical techniques,...
23.7K
01:37Super-resolution Fluorescence Microscopy
12.1K
Super-resolution fluorescence microscopy (SRFM) provides a better resolution than conventional fluorescence microscopy by reducing the point spread function (PSF). PSF is the light intensity distribution from a point that causes it to appear blurred. Due to PSF, each fluorescing point appears bigger than its actual size, and it is the PSF interference of nearby fluorophores that causes the blurred image. Various approaches to achieving higher resolution through SRFM have recently been...
12.1K