在复杂的咖啡和香料矩阵中对奥克拉托克辛A,B和C进行全面的IAC交叉反应性验证和稳定方法开发

科学领域:

• 食品科学 食品科学 食品科学
• 分析化学 分析化学
• 毒理学 毒理学 毒理学

背景情况:

• 毒素 (OT) 是重要的食品污染物,目前的分析和法规主要针对毒素A (OTA).
• 有毒的类似物, ochratoxin B (OTB) 和 ochratoxin C (OTC),在咖啡和香料等复杂的矩阵中经常被忽视.
• 现有的分析方法面临着矩阵干扰和某些 ochratoxin 类似物降解的挑战.

研究的目的:

• 开发和验证一种全面的分析方法,用于检测咖啡和香料矩阵中的多种 ochratoxins (OTA,OTB,OTC).
• 为了解决这些复杂的食品类型现有的免疫亲和列 (IAC) 和提取协议的局限性.
• 为准确的食品安全评估提供一个强大的工具,以评估有关毒素污染的情况.

主要方法:

• 系统确认商业OTA免疫亲和列与OTB和OTC的交叉反应性.
• 开发一种稳定的乙尼-水提取协议,以防止OTC降解.
• 为IAC加载和冲洗优化一种新的Tween-20-PBS缓冲器,以最大限度地减少矩阵干扰.
• 使用光检测 (HPLC-FLD) 的高性能液体染色学和用双重质谱法 (UHPLC-MS/MS) 的超高性能液体染色学方法的验证.

主要成果:

• 商业OTA IAC显示高交叉反应率 (>85%) 对OTB和OTC.
• 与传统的甲醇提取不同的是,一种新的提取协议 (乙二-水,8/2 v/v) 防止了OTC降解.
• 优化的IAC程序显著减少了咖啡和胡样品的矩阵干扰.
• 该方法在HPLC-FLD和UHPLC-MS/MS上表现出极好的线性 (r > 0.999),准确性 (82.00-112.51%恢复) 和精度 (RSD% ≤ 8.81%).
• 与HPLC-FLD (LOQ 0.3 μg/kg) 相比,UHPLC-MS/MS具有更高的灵敏度 (LOQ 0.1 μg/kg),其同位素内部标准对于矩阵效应校正至关重要.
• 对40个样本的分析显示,OTA在47.5%和OTA/OTB在3个子样本的同时发生.

结论:

• 这项研究建立了第一个全面验证的IAC方法,用于复杂食品矩阵中的多氧毒素分析.
• 开发的方法克服了现有协议的局限性,允许同时检测OTA,OTB和OTC.
• 这种经过验证的方法为改善食品安全监测和对冲毒素污染的风险评估提供了至关重要的工具.