使用微流体毛细管区电泳,对完整的单克隆抗体参考标准进行充电变异分析

科学领域:

• 生物制药学分析
• 分析化学 分析化学
• 质谱测量质量谱测量

背景情况:

• 单克隆抗体 (mAbs) 是重要的生物治疗药物,市场需求日益增长.
• 越来越复杂的mAbs需要先进的分析技术进行质量控制.
• 可靠的参考标准对于验证mAb特性方法至关重要.

研究的目的:

• 开发和优化微流体CZE-ESI-MS方法,用于完整的mAb特性.
• 为了使 mAb 蛋白质形式的高通量分析能够在最小的样本准备过程中进行.
• 在生物制药开发中建立一个强大的mAb质量保证方法.

主要方法:

• 开发和优化微流体毛细管区电泳喷射电离-质谱法 (CZE-ESI-MS) 方法.
• 利用高质量范围的MS数据采集进行完整的mAb分析.
• 在接近本地条件下分析了三个完整的mAb参考标准.

主要成果:

• 在15分钟以内用图形图样样本量对完整的mAbs及其蛋白形状进行了表征.
• 量化高丰度的修饰,如C端素剪切 (>95%) 和N链 glycosylation (>99%).
• 检测到低丰度的修饰,包括除化 (~3-7%) 和N-糖甘化 (<1.5%).

结论:

• 开发的CZE-ESI-MS方法提供了完整的mAbs.的高效和可重现的表征.
• 这种技术适用于工业生物制药质量保证和开发.
• 该方法支持准确评估mAb的安全性,功效和稳定性.