使用小分子有机探针进行3D亚-10nm多色扩展STED纳米镜的协议
Jing Yan1, Yubing Han1, Xiang Hao1
1State Key Laboratory of Extreme Photonics and Instrumentation, College of Optical Science and Engineering, Zhejiang University, Hangzhou 310027, China.
STAR protocols
|December 12, 2025
概括
这项研究引入了一种新方法,将小分子有机探针 (SMOP) 和自适应光学 (AO) 与膨胀刺激排放耗尽 (ExSTED) 显微镜相结合. 这种先进的技术可以实现10nm以下的分辨率,用于深度生物成像.
科学领域:
- 显微镜的使用方法
- 生物技术是生物技术.
- 光学成像技术的成像
背景情况:
- 扩展显微镜 (ExM) 通过物理放大来提高样本分辨率.
- 刺激发射耗尽 (STED) 显微镜提供高分辨率,但其深度有限.
- 整合先进技术对于更深入,更高分辨率的生物成像至关重要.
研究的目的:
- 介绍一个用于将小分子有机探针 (SMOP) 和自适应光学 (AO) 集成到扩展STED (ExSTED) 显微镜的协议.
- 在生物标本中,在10-50μm深度达到10nm以下的分辨率.
- 为细胞和组织结构的高分辨率3D成像提供工作流.
主要方法:
- 为SMOP设计,合成和细胞标签制定协议.
- 多色染色和细胞扩张程序.
- 适应光学校正的STED成像工作流程的实施.
主要成果:
- 成功将SMOP和AO集成到ExSTED显微镜中.
- 在10-50μm的深度实现了10nm以下的分辨率.
- 证明了细胞和组织结构的高分辨率3D成像能力.
结论:
- 开发的协议使生物成像具有前所未有的分辨率和深度.
- 这种ExSTED显微镜方法对于细胞和组织的详细结构分析非常有价值.
- 该协议促进了细胞生物学和神经科学领域的先进研究.
