使用RT-LAMP合CRISPR-Cas12b的基于战略的HCV RNA检测的快速测定

科学领域:

• 分子诊断学 分子诊断学
• 病毒RNA检测检测
• 在护理场所进行检测.

背景情况:

• 目前的C型肝炎病毒 (HCV) 诊断依赖于抗体和RNA测试,导致护理中断.
• 现有的HCVRNA测试是缓慢的,昂贵的,而且可用性有限.
• 需要快速,具有成本效益的HCVRNA检测,特别是在偏远和边缘化的人口中.

研究的目的:

• 开发一种具有成本效益,快速和灵敏的检测方法,用于检测C型肝炎病毒 (HCV) RNA.
• 改善HCV查和诊断,特别是在服务不足的人群中.

主要方法:

• 从血中提取RNA,然后进行反转录和循环介导同热放大 (RT-LAMP).
• 使用特定的原始体进行HCVRNA放大,并通过光读取CRISPR-Cas12b进行检测.

主要成果:

• 该检测检测到HCVRNA跨基因型1a,1b,2,3a和4具有高灵敏度和特异性.
• 基因型2的检测下限 (LLOD) 为250拷贝/毫升;对于临床样本 (基因型1),在45分钟内≥100 IU/毫升.
• 72例患者样本 (包括急性HCV和并发感染) 的临床敏感度为100%,33例阴性样本的特异性为100%.

结论:

• 开发的试验证明了从血中直接检测HCV RNA的高特异性和灵敏性.
• 该测试在45分钟内提供结果,使全球HCV感染的有效查和诊断成为可能.