工程纳米体之间的TR-FRET揭示了内源性CXCR4寡合物的存在

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 免疫学 免疫学 免疫学

背景情况:

• 化基因受体CXCR4和ACKR3在生理和病理过程中发挥作用.
• 之前的研究表明,CXCR4和ACKR3在过度表达系统中形成寡合体,但这在生理学环境中未得到证实.

研究的目的:

• 开发和验证一种用于在生理条件下检测G蛋白结合受体 (GPCR) 寡合体的新方法.
• 在本地细胞环境中调查内源性CXCR4和ACKR3寡合物的存在.

主要方法:

• 使用光标记的纳米体开发一个时间解析的福斯特共振能量转移 (TR-FRET) 试验.
• 纳米体的位点定向排序酶介导标记,以保持受体结合亲和力.
• 在转染细胞中进行验证,并随后应用于未转染的癌细胞系和人类初级血液细胞.

主要成果:

• 新型TR-FRET方法成功检测了CXCR4和ACKR3的同型和异型寡合体在转染细胞中.
• 在人类白血病/淋巴瘤衍生的癌症细胞系中首次发现了内源性CXCR4同类寡合体.
• 在原生条件下获得了强有力的证据支持外周血液单核细胞中存在CXCR4寡合体的证据.

结论:

• 开发的TR-FRET纳米体方法对于在生理环境中检测GPCR寡合体是有效的.
• 在人类癌细胞和原发性免疫细胞中,CXCR4同类寡合体存在内源性.
• 这一发现为了解化基因受体功能和开发向治疗开辟了新的途径.