在体外表达和 Toxoplasma gondii GRA1 蛋白质的血清活性,该蛋白质由未经修改和核酸修改的 mRNA 结构编码
Mehmet Nadir Şahinci1, Mert Döşkaya2, Muhammet Karakavuk3
1Ege University Vaccine Development Application and Research Center, İzmir, Turkiye; Ege University Institute of Health Sciences, Department of Vaccine Studies, İzmir, Turkiye; University of Saskatchewan, Biochemistry, Microbiology and Immunology, Saskatoon, Saskatchewan, Canada; University of Saskatchewan, Vaccine and Infectious Disease Organization, Saskatoon, Saskatchewan, Canada.
这项研究开发了一种针对毒素的mRNA疫苗,发现表达GRA1蛋白的未经修改的mRNA转录表现出更高的表达和潜在的免疫性. 为了在体内验证,需要进行进一步的研究.
科学领域:
- 疫苗学 疫苗学 疫苗学
- 寄生虫学的寄生虫学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 毒素菌引起的毒素菌 (Toxoplasma gondii) 影响了全球三分之一以上的人口,对孕妇和免疫力低下的人构成风险.
- 目前缺乏针对人类毒素的疫苗,这凸显了新型预防策略的必要性.
- 使者RNA (mRNA) 技术为开发安全有效的抗毒素菌疫苗提供了一个有前途的途径.
研究的目的:
- 设计和评估表达*T. gondii*重组GRA1蛋白的*体外*mRNA候选疫苗.
- 为了比较核酸修饰与未修饰的mRNA结构的蛋白质表达和免疫性.
- 为了研究聚-A尾巴长度对mRNA转化效率和蛋白质表达的影响.
主要方法:
- 设计了四种mRNA结构 (核酸修饰和未修饰,具有标准和扩展的多A尾巴) 来表达T. gondii*rGRA1蛋白.
- 使用HEK293T细胞培养,西部斑块和酶相关免疫吸收试验 (ELISA) 分析了蛋白质表达.
- 免疫原性通过Western blot和ELISA评估,使用来自T. gondii*感染小鼠的血清.
主要成果:
- 这四种mRNA结构都在HEK293T细胞中成功表达了rGRA1蛋白.
- 与核酸修饰的结构相比,未经修饰的mRNA结构表现出明显更高的蛋白质表达水平.
- 延长的多A尾部导致rGRA1蛋白表达的减少.
- 表达的rGRA1蛋白与*T. gondii*血清阳性小鼠血清中的抗体发生了强烈反应,表明了潜在的免疫性.
结论:
- 表达T. gondii* rGRA1蛋白质的未修改和核酸修改的mRNA结构都显示出作为疫苗候选人的潜力.
- 未经修改的mRNA转录显示出优异的*体外*蛋白质表达.
- 需要进行进一步的"体内"研究和脂质纳米粒子 (LNP) 封装,以验证这些发现,以开发针对毒素的疫苗.
更多相关视频
11:21Forward Genetics Screens Using Macrophages to Identify Toxoplasma gondii Genes Important for Resistance to IFN-γ-Dependent Cell Autonomous Immunity
Published on: March 12, 2015
09:49Determination of Chemical Inhibitor Efficiency against Intracellular Toxoplasma Gondii Growth Using a Luciferase-Based Growth Assay
Published on: April 29, 2020
