使用BCA染料测量NAD (H) 度,并应用于脱酶的测定

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 酶学 是一种酶学.

背景情况:

• 脱酶是代谢途径中的关键酶.
• 协酶NAD (H) 是许多脱酶的常见基质.
• 双酸 (BCA) 测定是一种测色方法,用于检测铜 (I) 离子.

研究的目的:

• 在BCA试验中研究NAD (H) 和铜之间的反应.
• 为了确定BCA测定对测量脱酶活性的有用性.

主要方法:

• 颜色变化的光谱光度测量.
• 测试开发用于NAD (H) 检测.
• 使用人类酸脱酶进行酶活性测定 1.

主要成果:

• 在BCA测定中,NAD (H) 与铜反应,产生可测量的颜色变化.
• 与NAD+ (>100μM) 相比,NADH的度较低 (<1μM至~50μM).
• 该BCA测定成功测量了人类酸脱酶1的活性.

结论:

• BCA测定可以调整以量化脱酶活性.
• NADH和NAD+的差异反应性允许进行特定的酶活性测量.
• 这种方法为研究脱酶功能提供了一种新的方法.