提高人类ACTH[1-39]量化的灵敏度和选择性,使用在线尺寸排除色谱和无抗体LC-HRMS
B R Jones1, L Shan2, A Spytko3
1Bioanalysis and Biomarkers, Crinetics Pharmaceuticals Inc., San Diego, CA, USA.
Bioanalysis
|December 26, 2025
概括
一种新的无抗体质谱测定方法可以准确地测量血中的 adrenocorticotropic 激素 (ACTH). 这种方法提高了临床诊断和其他激素测量的灵敏度和稳定性.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分析化学 分析化学
- 临床诊断 临床诊断 临床诊断
背景情况:
- 对上腺皮质激素 (ACTH) 的临床免疫试验缺乏选择性.
- 对ACTH的质谱测定 (MSA) 受到灵敏度的限制.
- 纳米液体染色学 (nano-LC) 提高了MSA灵敏度,但由于逆压而面临强度问题.
研究的目的:
- 开发一种无抗体,高度敏感和强大的方法,用于测量人体血中完整的ACTH.
- 为了克服现有的ACTH量化技术的局限性.
主要方法:
- 使用了多维纳米LC和高分辨率质谱方法.
- 集成的在线尺寸排除色谱 (SEC) 来减轻纳米LC的逆压.
- 采用高分辨率轨道飞行式质量分析仪进行ACTH[1-39]检测.
主要成果:
- 获得了对ACTH的临床相关敏感性[1-39] (3-5 pg/mL) 具有高精度和低偏差.
- 通过使用在线SEC与纳米-LC.LC.来证明减少反压效应.
- 通过使用无抗体试验,消除了抗体干扰.
结论:
- 开发的方法提供了灵敏,精确和可靠的人类血中ACTH的量化.
- 无抗体的多维纳米LC-MS/MS方法可以适应测量其他低丰度激素.
- 这种技术通过解决激素测量中的选择性和灵敏性挑战来改善临床诊断.
