简单和多功能工具包用于基因操纵Bacillus licheniformis的
Heng Yang1, Xue Gao1, Zi-Chu Jin1
1Key Laboratory of Agricultural Environmental Microbiology, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, College of Life Sciences, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, Jiangsu, China.
ACS synthetic biology
|December 27, 2025
概括
研究人员开发了Bacillus licheniformis的遗传工具包,使得有效的基因编辑成为可能. 这一系统为这种重要的细菌提供了无制造者淘汰,淘汰,CRISPRi和转子子突变的促进作用.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 合成生物学 合成生物学
- 细菌遗传学 细菌遗传学
背景情况:
- 菌是一种形成子的细菌,具有重要的益生菌,环境和工业相关性.
- 已经确定了许多具有不同功能的野生菌株,但由于缺乏有效的遗传工具,它们的研究受到限制.
- 工程B. licheniformis菌株对于释放它们在各种应用中的全部潜力至关重要.
研究的目的:
- 建立一个多功能和简单的基因操纵工具包,用于Bacillus licheniformis.
- 为了克服这种物种缺乏有效和普遍的遗传工具所带来的局限性.
- 促进对B. licheniformis进行基础和应用研究的研究和工程.
主要方法:
- 结合性DNA转移系统的开发作为工具包的核心组成部分.
- 使用温度敏感等离子体 (pTSMK) 在多个B. licheniformis菌株之间进行DNA转移.
- 基于开发的DNA转移系统,构建用于无制造者基因淘汰和敲进,CRISPR干扰 (CRISPRi) 和转子子突变的工具.
主要成果:
- 结合性DNA转移系统成功地将pTSMK等离子体转移到所有10个测试的B. licheniformis菌株中,效率在10-5到10-3.
- 该工具包使得制造商免费淘汰和敲进,CRISPRi和转子子突变发生的系统的构建成为可能.
- 使用开发的转子突变发生器工具,实现了7.68 × 10^-3的高转移频率.
结论:
- 一个全面和用户友好的基因操纵工具包已经成功地建立了Bacillus licheniformis.
- 这套工具解决了B. licheniformis.所需的大部分基因工程任务.
- 开发的工具包预计将大大推进涉及B. licheniformis.的基础研究和应用研究.
