鼠标胚胎干细胞和胚胎的实时成像:用于体外培养,显微镜和图像数据分析的协议

科学领域:

• 发育生物学 发展生物学
• 干细胞生物学 干细胞生物学
• 显微镜的使用方法

背景情况:

• 实时成像对于观察发育和干细胞生物学中的动态细胞过程至关重要.
• 目前的协议需要优化,以便对敏感的生物样本进行长期,高分辨率的成像.

研究的目的:

• 为实时成像小鼠多能干细胞 (mPSCs) 和胚胎提供优化的协议.
• 为了使细胞状态转换和形态遗传过程的定量分析.

主要方法:

• 使用共聚焦和光片显微镜进行实时成像.
• 实施优化的外宫培养,安装和环境控制系统.
• 采用计算工作流来进行图像处理,细分和细胞跟踪.

主要成果:

• 已建立的协议支持对mPSC和胚胎进行长期,生理相关的实时成像.
• 在成像过程中尽量减少光毒性.
• 启用了定量血统动态分析.

结论:

• 提出的协议为研究哺乳动物发育提供了一个全面和可重复的框架.
• 使用实时成像技术,促进对细胞状态转换和形态发生的研究.