强大的工作流程为多类宿主肠道微生物共代代谢物量化在人类便通过3-Nitrophenylhydrazine衍生和LC-MS/MS:一个验证的分析平台转化研究

科学领域:

• 代谢学 代谢学 代谢学
• 肠道微生物组研究研究
• 分析化学 分析化学

背景情况:

• 宿主肠道微生物的共同代谢物 (SCFA,BA,酸代谢物,BCAA) 对于免疫代谢健康至关重要.
• 肠道失调和代谢物水平的变化与像MASLD这样的疾病有关.
• 同时量化各种便代谢物是分析上具有挑战性的.

研究的目的:

• 开发和验证一个强大的分析工作流程,用于同时量化人类便中的多个宿主肠道微生物共同代谢物.
• 建立一种灵敏,准确和高效的方法来分析化学多样化的代谢物.
• 在MASLD中应用代谢资料的比较分析方法.

主要方法:

• 优化了3 - 尼托菲尼尔化衍生协议,调整了试剂度和反应后火.
• 采用了一种新的双添加移动相策略,采用混合模式的C18离子交换机静止相,以增强染色分离.
• 利用向液体色谱与双重质谱 (LC-MS/MS) 进行量化.

主要成果:

• 在23分钟内成功量化了38种代谢物 (15种SCFA,16种BA,4种酸代谢物,3种BCAA).
• 取得了优异的线性 (r2 > 0.99) 和精度 (CV <15%) 证明了代谢物稳定性.
• 在MASLD便中确定了不同的代谢特征,包括减少的SCFA和特定的BA变化.

结论:

• 建立了一个分析严格的平台,用于多类宿主肠道共同代谢物的便量化.
• 证明了该平台在肠肝轴障碍方面的翻译研究的实用性.
• 该方法为了解肠道代谢产物在MASLD病变发生过程中的作用提供了有价值的工具.