开发基于光两极化竞争试验的E3结合酶GID4的发展
Meiling Zhang1, Shijia Xiao1, Kexin Yan1
1Department of Medicinal Chemistry, Tianjin Key Laboratory on Technologies Enabling Development of Clinical Therapeutics and Diagnostics, School of Pharmacy, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China.
Bioorganic & medicinal chemistry letters
|December 29, 2025
概括
研究人员开发了一种新的光探针和测试方法,用于发现GID4 E3酶的配体. 这一进步旨在扩大针对蛋白质溶解向嵌合体 (PROTAC) 技术的工具箱,使向蛋白质降解成为可能.
科学领域:
- 生物化学和分子生物学
- 化学生物学 化学生物学
- 药物发现 药物发现 药物发现
背景情况:
- 蛋白质解质向嵌合体 (PROTAC) 技术通过ubiquitin-proteasome系统诱导向蛋白质降解.
- PROTACs需要对目标蛋白和E3合酶的连接体;然而,E3合酶连接体的有限可用性限制了PROTAC的开发.
- 使用Pro/N-degron通路的GID4 E3酶为PROTAC开发提供了一个新的目标.
研究的目的:
- 开发一种工具,用于识别GID4.4的新型E3酶配体.
- 建立一种高通量选 (HTS) 方法,用于评估GID4连接体.
- 为了促进PROTAC技术工具箱的扩展.
主要方法:
- 开发一种光探针,YG11,具有高亲和力 (Kd = 8.1 ± 0.7 nM) 的GID4.
- 建立基于光两极化 (FP) 的竞争试验,使用YG11进行GID4连接体查.
- 验证试验的稳定性,包括信号与噪声比 (>20),DMSO耐受性 (2.5%) 和Z'-因子 (0.84).
主要成果:
- 光探测器YG11显示了对GID4 E3结合酶的高结合亲和力.
- 开发的FP竞争试验是稳固的,适合GID4配体的HTS.
- 该试验具有出色的性能特征,证实了其在药物发现中的实用性.
结论:
- 光探测器和FP测定为快速识别GID4配体提供了一个强大的平台.
- 这项工作显著推进了使用GID4 E3结合酶的新型PROTACs的开发.
- 预计这些发现将加速基于向蛋白质降解的新治疗剂的发现.
