一种有效的方法,通过转移高密度的CHO细胞来增强暂时基因表达
Yu-Shun Fu1, Xue-Lian Han1,2, Wei-Dong Li1,2
1School of basic medical sciences, Xinxiang Medical University, Xinxiang, 453003, China.
AMB Express
|December 30, 2025
概括
优化中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中的短暂基因表达 (TGE) 使用高密度悬浮转移显著提高了重组蛋白产量. 这种增强的TGE系统提高了转染效率和细胞活力,以提高蛋白质的生产.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞被广泛用于重组蛋白质生产.
- 暂时基因表达 (TGE) 为稳定基因表达 (SGE) 提供了更快的替代方案,但往往由于蛋白质产量低而受到影响.
研究的目的:
- 优化CHO细胞中的短暂基因表达 (TGE) 系统,以增强重组蛋白质生产.
- 通过优化载体元素和转染条件来提高TGE中的蛋白质产量.
主要方法:
- 设计了矢量调节元件 (Kozak,polyA,introns,leader) 和优化了高密度悬浮转移的转移条件.
- 使用40kDa聚乙烯胺 (PEI) 进行转化.
- 确定了最佳的DNA度 (4μg/mL),DNA:PEI质量比 (1:5),并采用了重复转染策略.
主要成果:
- 实现了76.34%的转染效率,细胞活力超过85%.
- 增加了EGFP和SEAP的水平,分别是5.33倍和4.13倍.
- 增强治疗性蛋白质的产生,包括复合型III人体原 (4.86倍) 和人血清白蛋白 (5.50倍).
结论:
- 高密度悬浮转化显著增加了CHO细胞中短暂的重组蛋白质表达.
- 最优化的方法提高了转染效率,扩大了重组细胞群体,并保持了高细胞活力.
- 这种方法为高产量的过渡性转基因表达提供了一个有希望的策略.
