对人类3D多细胞肝球形模型的评估,作为研究肝转运器的平台

科学领域:

• 肝病学和药物新陈代谢
• 在体外毒理学模型中
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 越来越需要先进的体外肝脏模型来预测药物处置和体内载体介导药物相互作用.
• 2D三明治培养的人类肝细胞 (SCHH) 的局限性包括短期使用,脱差异化和缺乏非辅酶细胞.
• 关于多细胞肝球体 (MHS) 运输体表达,功能和适用于肝胆运输研究的不确定性.

研究的目的:

• 评估一个全人类的MHS模型,以长期评估肝移植者.
• 为了比较MHS中的载体度,调节,定位和功能与初级人类肝细胞 (PHH) 和SCHH.
• 在21天的培养期内,在MHS模型中研究胆酸代谢和运输.

主要方法:

• 利用了一个全人类MHS模型,包括初级人类肝细胞,库普弗,星状和内皮细胞.
• 在21天内监测输送体度 (蛋白质组学),调节 (RNA-seq),局部化 (免疫光),胆酸概况 (LC-MS/MS) 和功能运输 (B-CLEAR®).
• 将MHS数据与同一个捐赠者的新解的PHH和SCHH进行了比较.

主要成果:

• 与PHH相比,MHS在21天内下降了大多数肝移植体,而SCHH在第5天保持或增加了水平.
• 多重耐药性相关蛋白 (MRP) 4和有机溶液载体 (OST) -α/β在MHS中被上调,可能是由于胆汁酸的积累.
• 在MHS中证明了功能性的MRP2排泄和胆酸合成,新陈代谢和分泌;由于3D架构,在MHS中观察到CDF被困.

结论:

• MHS模型为长期肝移植体评估提供了一个有希望的平台,具有显著的MRP4和OST-α/β上调.
• 功能性肝胆运输和胆酸处理得到证实,突出显示了该模型的实用性.
• 确定了MHS的关键优势和局限性,用于评估肝胆运输,特别是关于输送器表达动态和3D架构效应.