开发基于PEDV S蛋白的间接ELISA,并评估其与中和抗体和免疫保护的相关性

科学领域:

• 兽医免疫学 兽医免疫学
• 病毒学 病毒学
• 测试开发 测试开发

背景情况:

• 猪流行性腹病毒 (PEDV) 对猪健康构成重大威胁,特别是在新生猪群中,导致高死亡率.
• 血清PEDV特异性IgG是评估疫苗诱导群体免疫力的关键标志物.
• 现有的诊断工具需要加强,以准确评估免疫力.

研究的目的:

• 开发和验证一种间接ELISA (iELISA) 检测PEDV特异性IgG.
• 建立一个有效的工具来评估疫苗接种后对PEDV的保护性免疫力.

主要方法:

• 通过使用中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞表达的复合PEDV尖端 (S) 蛋白开发了一种间接ELISA.
• 棋盘定位优化了抗原涂层度 (1微克/毫升) 和血清稀释 (1:300).
• 诊断截止点是根据50个阴性血清的样本与阳性 (S/P) 比率为0.796的.

主要成果:

• 该iELISA显示了高精度 (内和间试验CVs<6.30%) 和可重复性.
• 与其他五种常见的猪病毒的血清没有观察到交叉反应.
• 特定于PEDV的IgG水平与病毒中和抗体标位有很强的相关性 (r=0.95),并且与保护性群体结局有关.

结论:

• 开发的iELISA是一种精确和特定的工具,用于检测PEDV特异性IgG.
• 这种测试有效地评估疫苗诱导的免疫力,并与猪群的保护结果相关联.
• iELISA为监测PEDV群体免疫力和疫苗疗效提供了一种有价值的方法.