2,8-二氧化氨酸破坏了上皮的完整性,并在体外改变了细胞表型

科学领域:

• 腎臟病學 (nephrology) 是一種醫學專業.
• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物化学 生化学

背景情况:

• 氨酸基转移酶 (APRT) 缺乏导致2,8-二氧氨酸 (DHA) 积累,导致结石和慢性病 (CKD).
• 目前的治疗方法,如丁氧化还原酶抑制剂,并非所有患者都能容忍,因此需要采用替代治疗策略.
• 了解DHA对细胞的影响对于开发DHA结晶病的新疗法至关重要.

研究的目的:

• 研究DHA对脏细胞系的结构和分子作用 (HK-2,HEK293,MDCK).
• 为了确定在与DHA相关的脏疾病中治疗干预的潜在细胞点.

主要方法:

• 暴露HK-2,HEK293和MDCK细胞在不同度的DHA.
• 评估细胞活力,迁移和上皮完整性 (使用跨皮电阻 - TEER).
• 通过RNA测序和通过免疫光识别粘附蛋白对基因表达变化的分析.

主要成果:

• 暴露于DHA会以剂量依赖的方式降低细胞活力和迁移.
• DHA破坏了MDCK细胞的上皮完整性,由降低的TEER值表明.
• 在HEK293和HK-2细胞中,在DHA晶体附近观察到粘附蛋白CD44的表达增加.
• RNA测序揭示了DHA上调的TNF-α和mTORC1信号通路,同时降低了表皮-介质酶过渡 (EMT) 和氧化酸化的调节.

结论:

• DHA表现出剂量依赖的毒性,损害细胞的功能和完整性.
• CD44可能在DHA晶体粘附中发挥作用,呈现出潜在的治疗点.
• DHA显著改变了参与炎症,新陈代谢和细胞循环调节的细胞通路,导致损伤.