关于人类阿波利波蛋白AI的自我关联的新见解
Bryan Y Kang1, Juliette M Warner1, Paul M M Weers1
1Department of Chemistry and Biochemistry, California State University Long Beach, 1250 Bellflower Blvd, Long Beach, CA 90840.
脂蛋白A-I (apoA-I) 的自我结合,对于高密度脂蛋白的形成至关重要,由其C端域介导. 合体-8是apoA-I二分化中的关键,定位合体-10用于脂质结合.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 结构生物学 结构生物学
- 脂质代谢 脂质代谢是什么
背景情况:
- 阿波脂蛋白A-I (apoA-I) 对于高密度脂蛋白 (HDL) 组装和逆胆固醇运输至关重要.
- 没有脂质的apoA-I存在于两个领域:一个N端螺旋捆和一个参与自我关联的C端 (CT) 区域.
研究的目的:
- 研究在溶液中ApoA-I自我结合的结构基础.
- 在CT域内识别介导apoA-I二分化的特定结构元素.
主要方法:
- 位点定向的突变发生,在apoA-I.的CT域中在特定位置 (S201C,Q216C,S231C) 引入氨酸残留物.
- 用烯对氨酸残留物进行共价标记,光探针对分子近距离敏感.
- 光光谱检测烯排外体形成作为自我关联的指标.
- 氨酸特异性交叉链接以确认蛋白质的接近性.
- 尺寸排除色谱以确定不同度的apoA-I的寡合状态.
主要成果:
- 标志着近距离的Pyrene excimer光,对于S201C突变 (螺旋-8),最强,这表明它参与了自我关联.
- 稀释研究显示,S201C-apoA-I的长期表体光,证实了其稳定的自我关联状态.
- 对S201C的氨酸交叉连接效率最高,这证实了光数据.
- 尺寸排除色谱显示,apoA-I存在于0.02 mg/mL的单体和二元体,其二元化是由CT域驱动的.
- 对二元体的结构分析表明,螺旋-8被埋在另一个螺旋-8旁边,而螺旋-9和-10更容易暴露.
结论:
- 在apoA-I的C端域内的Helix-8在调解蛋白质二分化中起着至关重要的作用.
- 双面结构有利于-10与脂质相互作用,可能促进HDL的形成.
- 了解apoA-I自我关联,可以了解逆胆固醇运输的结构机制.
更多相关视频
07:29Cell-free Biochemical Fluorometric Enzymatic Assay for High-throughput Measurement of Lipid Peroxidation in High Density Lipoprotein
Published on: October 12, 2017
09:37Optimized Negative Staining: a High-throughput Protocol for Examining Small and Asymmetric Protein Structure by Electron Microscopy
Published on: August 15, 2014
相关概念视频
Lipid-derived Compounds in the Human Body
Fat-soluble Vitamins
Fat-soluble vitamins, including vitamins A, D, E, and K, are required in minimal quantities, but their deficiencies can lead to severely abnormal physiological conditions. For example, vitamin A deficiency can cause night blindness, dry skin,...
Protein Complex Assembly
Many viruses self-assemble into a fully functional unit using the infected host cell to...
Receptor-mediated Endocytosis
Atherosclerosis I: Introduction
Amyloid Fibrils
Amyloid deposits were observed as early as 1639 in the liver and the spleen. In 1854, Rudolph Virchow performed iodine staining,...
Amyloid Fibrils
