[针对Tim-3的哺乳动物细胞显示抗体库的构建,选和功能特征]
Lin Du1, Guoxian Li2, Chunxiao Du3
1Beijing Institute of Basic Medical Sciences, Beijing 100850; Joint National Laboratory for Antibody Drug Engineering, Key Laboratory of Cell and Molecular Immunology, School of Medical Sciences, Henan University, Kaifeng 475000, China.
概括
研究人员使用计算机辅助设计开发了一种针对T细胞免疫球蛋白和粘素域含有分子3 (Tim-3) 的新型人性化抗体. 这种增强的抗体显示出更好的亲和力和细胞因子上调,提供了一个有前途的新免疫治疗点.
科学领域:
- 免疫学和分子生物学
- 计算机化药物设计技术
背景情况:
- 含有T细胞免疫球蛋白和粘素域的分子3 (Tim-3) 是免疫反应的关键调节者,也是潜在的免疫治疗点.
- 现有的对人类Tim-3的小鼠抗体需要优化以提高治疗功能.
研究的目的:
- 通过计算机辅助分子设计,设计一个针对人类Tim-3的哺乳动物细胞显示抗体库.
- 选和识别一种具有优化亲和力和功能活性的新型抗Tim-3抗体.
主要方法:
- 计算机辅助的分子建模被用来设计父母的反人类Tim-3抗体中的氨基酸替代.
- 使用分子生物学技术 (重叠PCR,结合,转换) 构建了一个哺乳动物细胞显示的抗体库.
- 使用ELISA选高亲和度和高表达抗体,通过RT-PCR和CCK-8测定进行功能验证.
主要成果:
- 与父母抗体相比,成功生成了一种新型人性化抗Tim-3抗体,被指定为No.1,具有增强的结合亲和力.
- 抗体No.1显著上调了人类和小鼠细胞系中的关键细胞因子表达 (IFN-β,TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-2,IFN-γ).
- 功能性测试表明,抗体No.1具有优越的阻断效果和促进细胞增殖.
结论:
- 计算机辅助的分子设计和哺乳动物细胞显示技术使得开发出一种新的,高亲和度的anti-Tim-3抗体 (No.1).
- 工程抗体表现出增强的功能能力,包括强大的细胞因子诱导,验证其免疫疗法应用的潜力.
