肠道有机体作为在囊性纤维化中ASO介导的拼接调节的功能评估平台
Noemie Stanleigh1, Michal Irony-Tur Sinai1, Yifat Oren2
1Department of Genetics, the Hebrew University of Jerusalem, Israel.
概括
反感性寡核酸SPL84-23有效地纠正3849突变的囊性纤维化患者肠道器官中的CFTR拼接缺陷. 这项研究验证了肠道有机体作为评估CFTR拼接调制疗法的平台.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 遗传学 是一个遗传学.
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 目前的囊性纤维化 (CF) 疗法对患有阻止CFTR蛋白生产的突变患者是无效的.
- 反意义寡核酸 (ASO) 显示出针对特定CFTR突变的潜力.
- SPL84-23是一种SPL84的变体,在患者衍生细胞中显示出调节CFTR拼接和救援功能的潜力.
研究的目的:
- 研究肠道有机体作为评估基于ASO的CFTR拼接调制的平台.
- 评估SPL84-23在纠正CFTR中3849+10 kb的C→T拼接突变中的有效性.
主要方法:
- 开发了一种新的自由吸收协议,用于将ASO输入3D肠道有机体和2D单层.
- 使用RT-PCR和RT-qPCR测量了CFTR拼接调制.
- 评估功能性CFTR救援通过福斯科林诱导的有机体胀和单层短路电流测定.
主要成果:
- 使用来自3849 CFTR突变患者的肠道有机体建立了一个强大的模型.
- 在3D和2D系统中,SPL84-23治疗减少了78%的异常CFTR拼接.
- 在所有经过处理的有机体培养物中,CFTR功能显著改善.
结论:
- 肠道器官 (3D和单层) 是评估基于ASO的拼接调制疗法的合适平台.
- 肠道细胞中的高残留正确拼接的CFTR转录可能解释3849突变患者的较轻微肠道症状.
