副本数量基于Ixodes scapularis和Rhipicephalus microplus的变异分子性别分类 未成熟阶段 使用qPCR和ddPCR方法

科学领域:

• * 分子生物学 * 分子生物学
• * 昆虫学 昆虫学
• * 遗传学 遗传学是一门学科

背景情况:

• *对于生态和流行病学研究来说,准确地确定未成熟的 (幼虫和) 的性别至关重要,但由于缺乏明显的形态特征,这具有挑战性.
• *目前的局限性阻碍了对特定性别的行为,病原体传播动态和生殖策略的研究.

研究的目的:

• * 为未成熟的硬开发和验证可靠的分子性别识别方法.
• * 为了实现非破坏性DNA提取以继续的生存能力和随后的行为或发育分析.
• *将该方法应用于两个重要的物种:Ixodes scapularis* (公共卫生载体) 和Rhipicephalus microplus* (牛害虫).

主要方法:

• *使用基因组组合和重新排序数据识别 *NPD* 和 *RAPGEF2* 基因中的女性丰富拷贝数变异 (CNVs).
• * 开发定量PCR (qPCR) 和滴滴数字PCR (ddPCR) 试验以检测CNV.
• *从单一的腿中进行非破坏性DNA提取.

主要成果:

• *成功分配了87%的*Ixodes scapularis*的性别,在成年人化时确认了分配.
• * 通过使用qPCR测定,在*Rhipicephalus microplus*中确定了明显的性别相关的基因拷贝数差异.
• * 证明了基于CNV的标记物在未成熟的中用于确定性别的可靠性.

结论:

• *基于拷贝数变异 (CNV) 的分子标记器为未成熟的性别确定提供了可靠的方法.
• *开发的非破坏性技术保护了用于纵向研究,推动了生物学和控制方面的研究.
• *这种方法适用于影响公共卫生和农业的关键物种.